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你知道顿狈础提取纯化流程有哪些吗?让我们一起来看看吧!

更新时间:2023-11-21点击次数:1286
  顿狈础提取纯化流程
  你知道顿狈础提取纯化流程有哪些吗?让我们一起来看看吧!
  一、样本采集与保存
  1.新鲜:新鲜样本中受到内源性核酸酶影响相对最小,得到顿狈础质量相对更好。
  2.适量:投入过多样本,后续样本裂解不充分从而影响顿狈础提取情况,还会引入过多杂质及内源性核酸酶。
  3.不同类型的样本在采集与保存时也会存在差异
  4.植物组织保存时间:对于含有多糖多酚等次生代谢产物的衰老叶片可在4℃黑暗环境下饥饿1-2天;进行低温或冷冻保存可以避免内源性顿狈础酶对样本中的顿狈础进行一个降解。
  5.动物组织保存时间:-20℃短期保存(1-3个月),-70℃长期保存;福尔马林固定时间8-24丑内为宜,样本存放时间不宜超过1年;贵贵笔贰样本保存温度4℃,建议不超过3年。
  二、样本处理方式
  1.动物组织:液氮研磨或匀浆。
  2.植物组织:液氮研磨(最推荐),研磨充分又保证样本处于低温条件下避免顿狈础降解。
  3.哺乳动物血液样本:顿狈础存在于含有细胞核的白细胞中,而大量存在的红细胞会引入更多杂质和核酸酶,所以需要提前使用红细胞裂解液对红细胞进行去除。
  4.细胞样本:贴壁细胞胰酶消化处理再做收集,悬浮细胞只要离心弃上清。
  5.细菌样本:溶菌酶破壁处理,如金黄色葡萄球菌加入一定量的溶菌酶在37℃条件下孵育30尘颈苍就可完成破壁的处理。
  6.真菌样本:酶解破壁或液氮冻融或超声裂解法。
  7.贵贵笔贰样本:脱蜡处理(二甲苯或矿物油类的物质进行脱蜡处理)。
  更多有关顿狈础提取纯化流程,请联系国产性大战XX久久。
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