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标题: Polysciences PEI转染试剂介绍
在生命科学研究,特别是基因功能研究、蛋白表达和基因治疗等领域,将外源核酸(DNA、RNA)高效、安全地导入细胞内部是至关重要的实验步骤,这一过程称为转染。Polysciences公司作为国际锄名的生命科学试剂与材料供应商,凭借其深厚的技术积累,开发了一系列性能锄越的转染试剂,为全球科研工作者提供了高效、可靠的工具。以下是对于Polysciences PEI转染试剂的深度解析
一、 Polysciences PEI转染试剂核心优势
1. 广谱高效性
- 细胞兼容性极广:成功验证于HEK293、CHO、HeLa等常见细胞系,及原代细胞、干细胞、悬浮细胞(如Jurkat)等难转染类型。
- 多核酸适配:适用于质粒DNA、siRNA、mRNA及CRISPR-Cas9组件,尤其擅长大质粒(>10kb) 转染。
2. 成本效益比突出
- 价格仅为商品化试剂(如jetPEI®)的1/5-1/3,1g装售价约$100,可配制500mL以上工作液,单次转染成本低至$0.1。
3. 定制化灵活性
- 提供线性PEI(25 kDa) 与 支链PEI(25/40/60 kDa) 多分子量选择:
- 25 kDa线性PEI:毒性低,适合原代细胞
- 40 kDa支链PEI:转染效率高,适用标准细胞系
二、 Polysciences PEI转染试剂性能实测对比
指标 | Polysciences PEI | 进口竞品(如jetPEI®) |
HEK293效率 | 85-95% | 90-98% |
CHO细胞存活率 | >80% | >85% |
悬浮细胞效率 | 60-75% (Jurkat) | 65-80% |
批间稳定性 | 需自行质检 | 预质检认证 |
叁、 Polysciences PEI转染试剂操作关键点
1. 工作液配制
- 将PEI粉末溶解于无菌pH 4.5盐酸溶液,煮沸10分钟,调pH至7.0后过滤除菌(避免直接使用PBS导致沉淀)。
2. 转染复合物比例
- 黄金比例范围:
- DNA : PEI = 1μg : 2-4μg(贴壁细胞)
- DNA : PEI = 1μg : 3-6μg(悬浮/难转细胞)
- 孵育时间:15-30分钟(室温)
3. 毒性控制技巧
- 转染后6小时更换培养基,降低长期毒性
- 难转染细胞添加0.1mM丁酸钠提升表达
四、 Polysciences PEI转染试剂适用场景推荐
- 强烈推荐:
- 大规模生产(病毒包装、蛋白表达)
- 经费有限的实验室高频次转染
- 大片段DNA(>15kb)递送
- 谨慎使用:
- 对细胞毒性极度敏感的神经元
- 无血清培养体系(需优化复合物缓冲液)
五、 Polysciences PEI转染试剂缺陷与应对
1. 批次差异风险
- 每批PEI需用报告基因质粒(如pEGFP) 预实验确定最佳比例。
2. 沉淀问题
- 复合物出现絮状沉淀时,加入5-10%葡萄糖改善分散性。
3. 支原体污染
- 购买后立即分装冻存,使用前过滤(0.22μm)。
> 结论:Polysciences PEI是预算敏感型实验室的s选。其广谱性、高载量能力和极低单价优势显著,但需付出优化成本。掌握配制与比例控制要点后,可稳定获得媲美进口试剂的效果,特别推荐用于病毒生产和大规模转染项目。
注:建议蝉选货号24765-1(线性PEI 25kDa),适用性广,毒性可控。
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